近日，植物病理学著名学术期刊Plant Disease在线发表了我院黄俊文/邵玲团队与岭南师范学院和海南大学合作者完成的研究论文“Development and Application of a LAMP Assay for Detecting E198A-Type MBC-Resistant Clarireedia monteithiana”。研究团队围绕草坪重要病害币斑病，开发了一种快速、灵敏且可视化的抗药性检测技术，为该病害的精准防控提供了有力工具，破解了当前检测存在的“操作繁、耗时久、门槛高”难题。

币斑病是全球草坪（尤其是高尔夫球场和草坪景观）中最常见且危害最严重的病害之一，由Clarireedia属真菌引起。长期以来，苯并咪唑类杀菌剂（MBC）被广泛用于该病的防控，但其持续使用导致病原菌抗药性迅速演化。其中，药物靶点β-微管蛋白的编码基因第198位氨基酸发生E198A突变是导致该菌MBC高水平抗性的关键。此菌具有广泛的宿主范围，因而一旦这类高抗性菌株发生大规模扩散，将会显著削弱当前所使用的化学杀菌剂的防治效果，导致防控成本大幅增加，进而对草坪生态系统的健康构成严重威胁。然而，当前主流检测方法存在操作复杂、耗时长、设备依赖强、难以现场应用等问题，难以满足实际生产中“快速预警”的需求。

针对上述问题，研究团队开发了一种基于LAMP（环介导等温扩增）的检测系统，通过特异性引物组靶向识别携带E198A突变的MBC高抗性C. monteithiana菌株。该系统可在64°C恒温条件下60分钟内，实现对携带E198A突变的MBC高抗性C. monteithiana菌株实现精准识别，并可将近缘物种甚至同一物种的不同突变类型进行区分。通过从紫色到天蓝色的显著变化，系统的检测结果可通过肉眼判读。检测灵敏度结果显示，该系统的灵敏度较传统PCR高约100倍。在近田间条件且尚未观察到明显发病症状的条件下，该方法判定的准确率达95.83%–96.78%，显著优于PCR和测序，表明该系统在田间的病害早期、低菌量条件下仍具备良好的检测性能与应用潜力。

图1 基于LAMP的MBC-HR币斑病病原菌快速检测方法

本研究构建的LAMP快速检测体系可在无需复杂仪器的条件下，精准解决了传统检测存在的痛点，实现对币斑病病原菌中E198A型MBC高抗C. monteithiana菌株的早期、精准识别，为抗药性监测提供了高效实用工具，适合一线规模化推广。该方法有助于指导草坪病害的精准用药与科学管理，减少盲目施药带来的环境风险，并延缓抗药性扩散进程，对推动草坪病害绿色防控及农业可持续发展具有重要意义。

作者简介：

肇庆学院生命科学学院青年教师黄俊文博士为第一通讯作者，本科生郭盛杰和海南大学联培博士生杨锦玉为共同第一作者，岭南师范学院牛学礼博士和我院邵玲教授为共同通讯作者。章武研究员对本研究提供重要指导，李丽梅博士、梁凤兰高级实验师、朱惠敏实验师、张笑春实验师和吴少平博士参与了研究。肇庆学院为第一单位及第一通讯作者单位。该研究得到了广东省自然科学基金面上项目、肇庆学院博士科研启动项目、广东省教育厅乡村振兴重点领域研究项目和肇庆学院ESI提升计划等项目的资助。

期刊简介：

Plant Disease由American Phytopathological Society（美国植物病理学会）主办，创刊于1917年，是全球植物病理学领域历史悠久且具有重要影响力的学术期刊之一，当前5年影响因子为4.8（Q1），期刊于1980年更名为现名。百年来，期刊聚焦植物病害诊断、流行病学、防控策略及相关应用研究，在植物病理与植物保护领域积累了较高的学术地位并获得全球同行的广泛认可。